城市在恢復平靜后，大反派重新召集舊部卷土重來，并勾結外星惡勢力朗格試圖稱霸地球，忍者神龜萊昂納多（皮特·普勞澤克 Pete Ploszek 飾）、拉斐爾（阿蘭·里奇森 Alan Ritchson 飾）、多納泰羅（杰瑞米·霍華德 Jeremy Howard 飾）和米開朗基羅（諾爾·費舍 Noel Fisher 飾）與女記者艾蓓麗爾·奧尼爾（梅根·福克斯 Megan Fox 飾）、韋恩·芬威克（威爾·阿奈特 Will Arnett 飾），及面具義警凱西·瓊斯（斯蒂芬·阿梅爾 Stephen Amell 飾）并肩作戰打擊惡徒。在史萊德（布萊恩·泰 Brian Tee 飾）逃脫拘留后，他與瘋狂的科學家巴克斯特斯·托克曼（泰勒·派瑞 Tyler Perry 飾）及其兩個笨拙的左膀右臂豬面和牛頭聯合，發布了一個控制世界的惡魔計劃。在神龜們與史萊德及其同伙對抗的同時，他們發現自己正面臨著一個更邪惡的力量大反派格朗，神龜們面對的將是宇宙級的強大對手。

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